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Gemini血清900-108優(yōu)等FBS
胎牛血清(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS):是采自5-8個(gè)月胎齡牛胚胎中的胎血。此時(shí)胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發(fā)育因子,非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng),一旦胚胎發(fā)育,這些因子自動(dòng)消失。因此8個(gè)月胎齡以上的牛胚胎,已接近足月,不能作為胎牛血清的原料來使用。
新生牛血清(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS):采自出生一天~一周內(nèi)的新生牛;
小牛血清(Calf Serum):采自出生10-30天的小牛;
成牛血清(Adult Bovine Serum,簡稱ABS):采自成年牛收全血后分離得到血清。
所有血清出廠前均應(yīng)經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控,并附詳細(xì)《檢測報(bào)告》,
如pH值、滲透壓、內(nèi)毒素、病毒檢測、促細(xì)胞生長能力、無菌等檢查。
其中,由于內(nèi)毒素直接參與細(xì)胞凋亡,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果影響較大,且不同批次的血清,內(nèi)毒素差異又不易控制。
內(nèi)毒素含量越低的血清,級(jí)別就越高,以胎牛血清為例:
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時(shí),此血清為特級(jí)胎牛血清;
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時(shí),此血清為優(yōu)級(jí)胎牛血清;
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時(shí),此血清為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清;
胎牛血清 在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用:
1. 提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2. 提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3. 有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4. 是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5. 起酸堿度緩沖液作用。
6. 提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余yi danbaimei失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
7. 參與細(xì)胞凍存。
在細(xì)胞培養(yǎng)中,胎牛血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度大多為5%~20%(最常見為10%)的。具體到不同試驗(yàn),應(yīng)依據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo),或細(xì)胞類型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分來確定最佳濃度。
胎牛血清產(chǎn)品描述:
胎牛血清,是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。其中不含細(xì)胞、纖維蛋白和ning xue yinzi。
胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)方面通常優(yōu)于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過外界, 與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)也較低,是理想的細(xì)胞生長補(bǔ)充劑。
所有胎牛血清均在當(dāng)?shù)卣F醫(yī)部門的監(jiān)督下從注冊(cè)的出口屠場采集,符合國際動(dòng)物協(xié)會(huì)要求。
為避免不同供體間的個(gè)體差異,能夠更好保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的連續(xù)性和穩(wěn)定,應(yīng)使用同批次血清。
同批次血清:將經(jīng)過初步檢測合格的很多供體胎牛的粗血清,混合在一起,在低溫條件下,經(jīng)七次加壓過濾,最后三次為0.1 µm無菌過濾處理,得到淺黃色,澄清,稍粘稠液體。同一批次血清質(zhì)量上基本無差異。不同廠家一個(gè)批次產(chǎn)量差異較大,從100升到2000升不等。批次大,更利于試驗(yàn)的穩(wěn)定和連續(xù)的可參照性。
所有血清出廠前,均經(jīng)過嚴(yán)格質(zhì)控,每個(gè)批次附有詳細(xì)完整的《檢測報(bào)告》,包括:品名,貨號(hào),批號(hào),血源地,生產(chǎn)日期,保質(zhì)期,pH值、滲透壓、血紅蛋白、總蛋白、球蛋白、IgG、內(nèi)毒素、無菌檢查(細(xì)菌、真菌、支原體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細(xì)胞病變效應(yīng)等)、促細(xì)胞生長能力、細(xì)胞毒性、BVD-1/2抗體檢查等。
胎牛血清儲(chǔ)存條件:
-20°C凍存。
胎牛血清解凍后,應(yīng)按單次習(xí)慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。
若置于4°C的血清,應(yīng)在一周內(nèi)用完。
為保證細(xì)胞培養(yǎng)的最佳效果,血清和培養(yǎng)基的配置,應(yīng)遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配"原則。配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。
血清避免反復(fù)凍融,避免在4°C或更高溫度儲(chǔ)存過久,否則會(huì)破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。
胎牛血清是否要熱滅活:
shouxian胎牛血清不推薦熱滅活。
熱滅活一般是指在做免疫相關(guān)的試驗(yàn)中,通過加熱滅活掉血清中的補(bǔ)體,以避免對(duì)免疫試驗(yàn)的影響。
在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補(bǔ)體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會(huì)真正干預(yù)免疫試驗(yàn)。故不需滅活。
并且,熱滅活反而可能導(dǎo)致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進(jìn)而影響細(xì)胞培養(yǎng)效果。
若針對(duì)某些特殊試驗(yàn),對(duì)于胎牛血清一定要做熱滅活,國際上推薦熱滅活的方法:40℃水浴,20min。
胎牛血清融化方法:
血清融化 專業(yè)方法:
目的;更好保留血清中活性成分,使細(xì)胞培養(yǎng)更穩(wěn)定。
推薦國際血清廠家 專業(yè)融化方法(此方法國際通用,適用于所有種類的血清):
操作 | 溫度 | 100ml | 500ml | 1000ml |
第一步 | 室溫 | 35 min | 90 min | 100 min |
或15-20℃水浴 | 5 min | 18 min | 20 min | |
第二步 | 20℃水浴 | 15 min | 25 min | 30 min |
第三步 | 37℃水浴 | 20 min | 35 min | 45 min |
注意:
?在水浴過程中,血清的平面要沉浸在水中。在融化過程中要慢慢搖動(dòng)瓶身,使血清混勻,但搖動(dòng)中盡量不要產(chǎn)生泡沫!
胎牛血清 使用說明
血清從-20℃取出后,融化,按推薦體積加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,混勻,制備成新鮮培養(yǎng)基。(整個(gè)操作需在無菌超凈臺(tái)中進(jìn)行,注意無菌操作。)配置好的培養(yǎng)基推薦在4℃保存,應(yīng)在1周內(nèi)用完。
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PAN ST30-2602 Fetal Bovine Serum 500ML 特級(jí)
PAN P30-3302 Fetal Bovine Serum 500ML 南美源優(yōu)等
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Gemini 100-500 Fetal Bovine Serum 500ML 美國源
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Sciencell 0510 Fetal Bovine Serum 500ML 南美優(yōu)等
Sciencell 0500 Fetal Bovine Serum 500ML 美國源特級(jí)
SIGMA F2442 Fetal Bovine Serum 500ML 美國源
SIGMA F0193 Fetal Bovine Serum 500ML 南美源
SIGMA F8318 Fetal Bovine Serum 500ML 澳洲源
SIGMA F8687 Fetal Bovine Serum 500ML 澳洲源
Bovogen SFBS Fetal Bovine Serum 500ML 南美源
Bovogen SFBS Fetal Bovine Serum 500ML 新西蘭源
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SERANA S-FBS-SA-015 Fetal Bovine Serum 500ML 南美
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GEMINI 100-512 Human Serum AB 100ML 美國
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Cegrogen A0500-3011 Fetal Bovine Serum 500ML 南美源 特級(jí)高
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