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SC,ATCC細(xì)胞株簡介:
產(chǎn)品名稱:SC
來源:美國ATCC
數(shù)量:大量
生長狀態(tài):懸浮生長
器官來源:外周血
細(xì)胞形態(tài):單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞
相關(guān)疾?。浩渌膊?/span>
是否是腫瘤細(xì)胞:0
物種來源:人
運(yùn)輸方式:凍存運(yùn)輸
庫存狀態(tài):現(xiàn)貨
復(fù)蘇周期:10個(gè)工作日左右
美國ATCC品牌介紹:美國菌種保藏中心,又稱美國模式菌種收集中心(ATCC),是位于馬里蘭洲洛克菲勒的一家私營的,非贏利性組織。目前它可以提供各種動(dòng)植物細(xì)胞、標(biāo)準(zhǔn)品、菌株達(dá)兩萬多種。ATCC的成立可追溯到1925年,一個(gè)科學(xué)委員會(huì)認(rèn)識到科學(xué)研究對于微生物的大量需求而萌發(fā)了創(chuàng)建一個(gè)微生物相關(guān)制品供應(yīng)中心的想法?;鄯f生物通過自己的渠道為國內(nèi)科研以及生產(chǎn)用戶提供美國ATCC細(xì)胞株、菌株等生物標(biāo)準(zhǔn)品。貨期短,*,不需要客戶填寫詳細(xì)資料,幫客戶辦理一切海關(guān)手續(xù),方便快捷!
SC,ATCC細(xì)胞株,細(xì)胞培養(yǎng)的過程中,經(jīng)常見到黑色的顆粒或小黑點(diǎn),這種情況是怎么引起的呢?該怎么避免呢?
原因:
黑點(diǎn),大概有細(xì)胞本身帶的,環(huán)境有的,還有人身上帶進(jìn)細(xì)胞間的, 還有就是血清和培養(yǎng)基。
解決辦法:
1、如果小黑點(diǎn)有增殖趨勢,那么就有可能是污染了,需要處理;
2、如果小黑點(diǎn)沒有增殖趨勢,且不影響細(xì)胞生長,也不影響實(shí)驗(yàn)的話,則可能
a、是「黑膠蟲」,黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物,本身就存在爭議。有人認(rèn)為是從血清中來的一種原蟲,也有人認(rèn)為是細(xì)菌,或是真菌,也有人認(rèn)為是血清中的蛋白的結(jié)晶。「黑膠蟲」可寄生于動(dòng)物細(xì)胞,也可以生存于培養(yǎng)基中,依靠細(xì)胞和培養(yǎng)基中的營養(yǎng)為生,并隨細(xì)胞傳代而傳代?!负谀z蟲」與細(xì)胞競爭性生長,開始時(shí)對細(xì)胞并沒有什么影響,但當(dāng)黑膠蟲的數(shù)量多到一定程度的時(shí)候, 細(xì)胞生長就會(huì)受到影響直至死亡,嚴(yán)重影響了科研活動(dòng)的開展和進(jìn)行。以前(這個(gè)至少是 10 年以前),很多實(shí)驗(yàn)室在養(yǎng)細(xì)胞時(shí)用國產(chǎn)血清,那時(shí)的血清可能質(zhì)量不過關(guān),有所謂的「黑膠蟲」,但是也沒有明確的鑒定。但是現(xiàn)在的血清,即使國產(chǎn)的,如四季青等稍大點(diǎn)的廠家,產(chǎn)品里這種現(xiàn)象就少見了。
b、是細(xì)胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗運(yùn)動(dòng)。
c、是核糖體,也可能是雜質(zhì)
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,傳代培養(yǎng)
懸浮細(xì)胞:
1.懸浮細(xì)胞常規(guī)傳代操作為半量換液,分瓶傳代,即取出一半細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);也可根據(jù)細(xì)胞密度分多瓶傳代。
2.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液,待細(xì)胞密度達(dá)到70-80%時(shí)重復(fù)傳代操作或者凍存。
半貼壁半懸浮細(xì)胞:
1.若懸浮細(xì)胞較多且折光率良好,可離心收集,繼續(xù)培養(yǎng)。
2.若有少量細(xì)胞懸浮,也可不用收集,傳代操作按常規(guī)貼壁細(xì)胞操作流程處理。
3.若懸浮細(xì)胞較多,離心收集,原瓶中貼壁細(xì)胞按照常規(guī)規(guī)貼壁細(xì)胞操作流程進(jìn)行消化、終止消化、吹打,并與之前收集的懸浮細(xì)胞混懸,分瓶培養(yǎng)。
貼壁細(xì)胞:
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml 含0.25% EDTA的胰酶進(jìn)行消化(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?~2min)
2.鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小時(shí)去掉胰酶,加6~8 ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落、吹散;
3.取出部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液,待細(xì)胞密度達(dá)到70-80%以后重復(fù)傳代操作或者凍存。
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