公司提供2種形式的9L細(xì)胞，小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞株：

一種是凍存產(chǎn)品，由液氮直接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒操作好；另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，-80C也不是細(xì)胞儲存的方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；再者干冰運(yùn)輸需要額外添加運(yùn)費(fèi)(順豐)。

另一種是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大，運(yùn)費(fèi)較低(聯(lián)邦或順豐)。

上?；鄯f生物科技有限公司坐落于美麗的嘉定南翔鎮(zhèn)，2014年獲得澳洲BOVOGEN產(chǎn)品代理權(quán)，2015年獲得德國SERANA產(chǎn)品總銷售權(quán)，為國內(nèi)科研機(jī)構(gòu)提供高品質(zhì)動物血清和蛋白產(chǎn)品。

慧穎生物為完善的產(chǎn)品供應(yīng)渠道和售后服務(wù)。我們力求工作*，在處理客戶的咨詢、訂購、到貨、售后服務(wù)、等方面追求更專業(yè)、更快捷、更及時。

上海慧穎生物的經(jīng)營原則是“質(zhì)量*，誠信*”，以“質(zhì)量是企業(yè)的生命，誠信是經(jīng)營的資本”為警醒，嚴(yán)把所售出商品的質(zhì)量關(guān)，不做任何有損顧客利益的事情。

一直以來慧穎生物都為廣大科研工作者的工作提供材料或者是研究條件，我們是依托廣大科研工作者的信任才能發(fā)展至今，并且與廣大科研者的科研工作一直成長，我們對此一直非常感謝眾多的新老顧客，如今又是一年的試劑購買旺季，我們素爾生物也是為了感謝并且回饋廣大新老顧客，特推出素爾熱賣動物血清，確保正品，確保質(zhì)量穩(wěn)定，爭取批次間差異降到zui小，真正的讓您感到物有所值。素爾生物在此希望廣大科研工作的工作可以步步皆高，生活如意幸福。

慧穎細(xì)胞庫400種類細(xì)胞株細(xì)胞系，20多株耐藥株，超低折扣，種類涵蓋：成纖維細(xì)胞 長尾綠猴胚胎細(xì)胞 長尾綠猴腎細(xì)胞 小鼠乳腺癌細(xì)胞 人膀胱癌細(xì)胞 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞 人腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 人甲狀腺癌細(xì)胞 卵巢癌細(xì)胞 干細(xì)胞 結(jié)腸癌細(xì)胞 胃癌細(xì)胞 乳腺類細(xì)胞 等

以下為購買細(xì)胞系后的售后小知識：

1、CO2 培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔？

定期（至少每兩周一次） 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之。

2、為何培養(yǎng)基保存于4 ℃ 冰箱中， 顏色會偏暗紅色， 且pH值會越來越偏堿性？

培養(yǎng)基保存于4 ℃ 冰箱中， 培養(yǎng)基內(nèi)之CO2 會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑（通常為phenol red） 的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果， 將造成細(xì)胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時， 可以通入無菌過濾之CO2， 以調(diào)整pH 值。

3、各種細(xì)胞培養(yǎng)用的dish，flask是否均相同？

不同廠牌的dish 或flask， 其所coating 的polymer 不同， 制造程序亦不同， 雖對大部分細(xì)胞沒有太大之影響， 惟少數(shù)細(xì)胞則可能因使用廠牌不同之dish 或flask 而有顯著之生長差異。

4、購買之細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？ 購買之細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？

研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳， 常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細(xì)胞解凍后， 加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細(xì)胞置于–80℃太久。

我公司出售Elisa試劑盒，一抗，二抗，動物血清，細(xì)胞株細(xì)胞系，標(biāo)準(zhǔn)品，生化試劑，日本三菱厭氧罐及安寧包系列，GE填料以及凝膠系列產(chǎn)品，質(zhì)粒以及質(zhì)粒搭建。

一個合格的質(zhì)粒含有以下組成部分：

復(fù)制起始位點(diǎn)Ori：即控制復(fù)制起始的位點(diǎn)。原核生物DNA分子中只有一個復(fù)制起始點(diǎn)，而真核生物DNA分子有多個復(fù)制起始位點(diǎn)。

抗生素抗性基因：可以便于篩選或檢測，如Amp+ 、Kan+。

多克隆位點(diǎn)MCS：克隆攜帶外源基因片段。

P/E：啟動子/增強(qiáng)子。

Terms：終止信號。

加poly(A)信號：可以起到穩(wěn)定 mRNA 作用。

 如何閱讀質(zhì)粒圖譜：

*步：首先看 Ori 的位置，了解質(zhì)粒的類型（原核/真核/穿梭質(zhì)粒）。

第二步：再看篩選標(biāo)記，如抗性，決定使用什么篩選標(biāo)記。

--Ampr   水解β-內(nèi)酰胺環(huán)，解除氨芐的毒性；

--tetr   可以阻止四環(huán)素進(jìn)入細(xì)胞；

--camr   生成氯霉素羥乙?；苌?，使之失去毒性；

--neor(kanr)   氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶 使G418（長那霉素衍生物）失活；

--hygr   使潮霉素β失活。

第三步：看多克隆位點(diǎn)（MCS）。它具有多個限制酶的單一切點(diǎn)，便于外源基因的插入。如果在這些位點(diǎn)外有外源基因的插入，會導(dǎo)致某種標(biāo)志基因的失活，從而便于篩選。MCS決定了能不能放置目的基因以及如何放置目的基因。

第四步：再看外源DNA插入片段大小。質(zhì)粒一般只能容納小于10Kb的外源DNA片段。一般來說，外源DNA片段越長，越難插入，越不穩(wěn)定，轉(zhuǎn)化效率越低。

第五步：是否含有表達(dá)系統(tǒng)元件，即啟動子－核糖體結(jié)合位點(diǎn)－克隆位點(diǎn)－轉(zhuǎn)錄終止信號，這是用來區(qū)別克隆載體與表達(dá)載體。在克隆載體中加入一些與表達(dá)調(diào)控有關(guān)的元件即成為表達(dá)載體。選用哪種載體，要以實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑橐罁?jù)。

啟動子：促進(jìn)DNA轉(zhuǎn)錄的DNA序列，這個DNA區(qū)域常在基因或操縱子編碼順序的上游，是DNA分子上可以與RNApol特異性結(jié)合并使之開始轉(zhuǎn)錄的部位，但啟動子本身不被轉(zhuǎn)錄。

增強(qiáng)子/沉默子：增強(qiáng)子為真核基因組（包括真核病毒基因組）中的一種具有增強(qiáng)鄰近基因轉(zhuǎn)錄過程的調(diào)控序列，其作用與增強(qiáng)子所在的位置或方向無關(guān)（即在所調(diào)控基因上游或下游均可發(fā)揮作用）。/沉默子：負(fù)增強(qiáng)子，負(fù)調(diào)控序列。

核糖體結(jié)合位點(diǎn)/起始密碼/SD序列（Rbs/AGU/SDs）：mRNA有核糖體的兩個結(jié)合位點(diǎn)，對于原核而言是AUG（起始密碼）和 SD序列。

轉(zhuǎn)錄終止順序（終止子）/翻譯終止密碼子：結(jié)構(gòu)基因的zui后一個外顯子中有一個 AATAAA的保守序列，此位點(diǎn)down-stream有一段GT或T富豐區(qū)，這2部分共同構(gòu)成poly(A）加尾信號。

為什么質(zhì)粒圖譜上有的箭頭順時針有的箭頭逆時針？那其實(shí)是代表兩條DNA鏈，即質(zhì)粒是環(huán)狀雙鏈 DNA，它的啟動子等在其中一條鏈上，而它的抗性基因在另一條鏈上。

如何選擇載體

把目的基因通過基因工程手段送到生物細(xì)胞（受體細(xì)胞），需要運(yùn)載工具（交通工具）攜帶外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞，這種運(yùn)載工具就叫做載體（vector）?；蚬こ趟玫膙ector實(shí)際上是用來攜帶目的基因片段進(jìn)入受體細(xì)胞的 DNA。

選擇載體主要依據(jù)構(gòu)建的目的，同時要考慮載體中應(yīng)有合適的限制酶切位點(diǎn)。如果構(gòu)建的目的是要表達(dá)一個特定的基因，則要選擇合適的表達(dá)載體。

產(chǎn)品名稱：9L細(xì)胞

中文名稱：小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞

種屬：小鼠

生長狀態(tài)：貼壁生長|懸浮生長|半貼壁

細(xì)胞形態(tài)：上皮樣|成纖維樣|圓形|球形|梭形|不規(guī)則形態(tài)

周期：凍存細(xì)胞3-4個工作日發(fā)貨，復(fù)蘇細(xì)胞1-2周發(fā)貨

質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，超低折扣價格，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。

細(xì)胞到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

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ATCC細(xì)胞|癌細(xì)胞|復(fù)蘇細(xì)胞|貼壁細(xì)胞|國產(chǎn)細(xì)胞|正常細(xì)胞株|Sceiencell細(xì)胞|耐DDP細(xì)胞|耐藥株建系 盡在素爾生物 值得信賴

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A2780細(xì)胞 A2780/DDP細(xì)胞 MC38細(xì)胞 SH-SY5Y細(xì)胞 DC2.4細(xì)胞 HT-22細(xì)胞 HOS細(xì)胞 HEK-293-6E細(xì)胞 HK-2細(xì)胞 MC3T3-E1細(xì)胞 熱賣

9L細(xì)胞，小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞株 細(xì)胞吹打經(jīng)驗(yàn)之談：

急速的反復(fù)吹打肯定容易產(chǎn)生泡沫，這對細(xì)胞不利，所以我們要盡量避免。在操作時盡量選用較大口的吸管，吸液時先將吸管內(nèi)空氣排空，再深入液面以下吸液，吹打細(xì)胞時，盡量沿著壁吹出液體，操作輕柔，就可zui大程度避免泡沫的產(chǎn)生！

1.有一些細(xì)胞可以不用消化液就能夠吹打下來。個人認(rèn)為能不用消化液是的。譬如巨噬細(xì)胞。一直維持巨噬細(xì)胞，每次傳代都不用消化液，吹打的時候一般會用瓶內(nèi)未換的剩余舊培養(yǎng)液，這樣比用新的培養(yǎng)基可以減少點(diǎn)泡沫的生成。當(dāng)然這個一定要求原培養(yǎng)基未被污染。

2. 吹打的時候我們都知道要一點(diǎn)挨著一點(diǎn)吹，這樣不會漏掉地方。而每次都會首先沿著兩條對角線的方向吹打，然后再按照橫著或者是豎著吹打。這樣就可以比較容易把細(xì)胞吹下來，因?yàn)槭紫燃?xì)胞的各個方向都受力了，而且比較均勻，細(xì)胞比較容易下來，而且對細(xì)胞形態(tài)的維護(hù)比較好。

3.對膠頭滴管的要求。膠頭滴管頭部是做成彎曲45度角的形狀，一般都是自己用止血鉗夾住頭部在酒精燈上燒彎。發(fā)現(xiàn)，如果吹打的時候，滴管的頭部邊緣如果是和吹打平面平行的話，反而容易產(chǎn)生泡沫，貼在底部吹，也容易產(chǎn)生泡沫，是能夠有一個角度順著你吹打的方向和滴管*。并且稍微遠(yuǎn)離吹打面，這樣滴管內(nèi)的液體容易流出，阻力會減小，就不會產(chǎn)生那么多的泡沫了。

4.控制吹打的節(jié)奏，急速地吹打會很快地產(chǎn)生泡沫，用力越大，越容易產(chǎn)生。是能夠把握住自己的力度和節(jié)奏，有條不紊的吹打。是以自己拿滴管用手的輕松程度為準(zhǔn)，如果剛吹幾下很快就累的話，那就證明是節(jié)奏過快。吹完都不累的話那就是太慢力度也不夠。一般在吹完一遍時指頭發(fā)困會比較好。這樣的節(jié)奏能夠比較快速而且有效地完成。

覺得zui關(guān)鍵的操作是不要吹打到底。

培養(yǎng)細(xì)胞多年，避免氣泡產(chǎn)生要注意以下兩點(diǎn)：

1 吹打用的培養(yǎng)基不能太少，如果只有1-2mL，氣泡難以避免；

2 吸管每次打出液體后立刻深入液面下吸取液體。

相關(guān)9L細(xì)胞，小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞株熱賣產(chǎn)品：

5637細(xì)胞株    M     urinary_tract   尿路；[解剖] 泌尿道    NS    不明確

1321N1細(xì)胞株        M     central_nervous_system         中樞神經(jīng)系統(tǒng)         astrocytoma    星形細(xì)胞瘤

143B細(xì)胞株   F       bone         骨骼         NS    不明確

22Rv1細(xì)胞株 M     prostate  前列腺     NS    不明確

23132/87細(xì)胞株    M     stomach  胃；腹部         adenocarcinoma      腺癌；惡性腺瘤

253J 細(xì)胞株     urinary_tract   尿路；[解剖] 泌尿道    transitional_cell_carcinoma    移行細(xì)胞癌

253J-BV細(xì)胞株       U      urinary_tract   尿路；[解剖] 泌尿道    transitional_cell_carcinoma    移行細(xì)胞癌

42-MG-BA細(xì)胞株   M     central_nervous_system         中樞神經(jīng)系統(tǒng)         astrocytoma_Grade_IV  星形細(xì)胞瘤分級IV

59M F細(xì)胞株  ovary        卵巢         NS    不明確

639-V細(xì)胞株  M     urinary_tract   尿路；[解剖] 泌尿道    transitional_cell_carcinoma    移行細(xì)胞癌

647-V細(xì)胞株  M     urinary_tract   尿路；[解剖] 泌尿道    transitional_cell_carcinoma    移行細(xì)胞癌

769-P細(xì)胞株  F       kidney       腎臟         clear_cell_renal_cell_carcinoma     透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌

786-O細(xì)胞株  M     kidney       腎臟         clear_cell_renal_cell_carcinoma     透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌

8305C細(xì)胞株 F       thyroid     甲狀腺；甲狀軟骨；甲狀腺劑     anaplastic_carcinoma     未分化癌

8505C細(xì)胞株 F       thyroid     甲狀腺；甲狀軟骨；甲狀腺劑     anaplastic_carcinoma     未分化癌

8-MG-BA F細(xì)胞株  central_nervous_system         中樞神經(jīng)系統(tǒng)         astrocytoma_Grade_IV  星形細(xì)胞瘤分級IV

A101D細(xì)胞株          M     skin  皮膚；外皮     NS    不明確

A1207細(xì)胞株          central_nervous_system         中樞神經(jīng)系統(tǒng)         NS    不明確

A172細(xì)胞株   M     central_nervous_system         中樞神經(jīng)系統(tǒng)         astrocytoma_Grade_IV  星形細(xì)胞瘤分級IV

A-204細(xì)胞株  F       soft_tissue       軟組織     NS    不明確

A2058細(xì)胞株 M     skin  皮膚；外皮     NS    不明確

A-253細(xì)胞株  M     salivary_gland 唾腺         mucoepidermoid_carcinoma  粘液表皮樣癌；粘表皮癌

A2780細(xì)胞株 F       ovary        卵巢         adenocarcinoma      惡性腫瘤，腺癌

A3/KAW細(xì)胞株       F       haematopoietic_and_lymphoid_tissue   血液、淋巴組織     diffuse_large_B_cell_lymphoma     彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤

A-375細(xì)胞株  F       skin  皮膚；外皮     NS    不明確

A4/Fuk細(xì)胞株         F       haematopoietic_and_lymphoid_tissue   血液、淋巴組織     diffuse_large_B_cell_lymphoma     彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤

A-498細(xì)胞株  F       kidney       腎臟         renal_cell_carcinoma      腎細(xì)胞癌

A549細(xì)胞株   M     lung 肺     non_small_cell_carcinoma      非小細(xì)胞癌

A-673細(xì)胞株  F       bone         骨骼         NS    不明確

A-704細(xì)胞株  M     kidney       腎臟         renal_cell_carcinoma      腎細(xì)胞癌

ABC-1細(xì)胞株 M     lung 肺     non_small_cell_carcinoma      非小細(xì)胞癌

ACC-MESO-1細(xì)胞株                 pleura       胸膜； 肋膜  NS    不明確

ACHN細(xì)胞株  M     kidney       腎臟         renal_cell_carcinoma      腎細(xì)胞癌

AGS細(xì)胞株     F       stomach  胃；腹部         adenocarcinoma      腺癌；惡性腺瘤

Alexander cells細(xì)胞株   M     liver 肝     hepatocellular_carcinoma       肝癌

697  細(xì)胞株M        haematopoietic_and_lymphoid_tissue   血液、淋巴組織     acute_lymphoblastic_B_cell_leukaemia          急性淋巴細(xì)胞B細(xì)胞白血病23132/87

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