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MS1細(xì)胞|慧穎科研用|小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞株 細(xì)胞株購(gòu)買,細(xì)胞株價(jià)格,培養(yǎng)基,培養(yǎng)條件,形態(tài),細(xì)胞圖片等,請(qǐng)找慧穎王老師 !
產(chǎn)品名稱:MS1細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源:小鼠胰島內(nèi)皮
生長(zhǎng)狀態(tài):貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài):上皮樣
培養(yǎng)基:DMEM 95%, Fetal Bovine Serum 5%
培養(yǎng)條件:37℃ 5% CO2
消化條件:0.25% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA 溶液,靜止消化 5-10min
消化比例:1:4-1:8
換液時(shí)間:2-3 天換液一次
凍存液比例:85%培養(yǎng)基,10%FBS, 5% (v/v) DMSO
凍存密度:1-3 ×10^6/管,液氮保存
MS1細(xì)胞|慧穎科研用|小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞株 全國(guó)各地均可發(fā)貨,全國(guó)統(tǒng)一價(jià)格
產(chǎn)品名稱:MS1細(xì)胞
規(guī)格:70%-80%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細(xì)胞一瓶
特點(diǎn):細(xì)胞代數(shù)為3-5代左右
包裝:內(nèi)層無(wú)菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞來(lái)源:ATCC
貨期:1-2周
運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸
售后:收到細(xì)胞后7天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)傳真或致銷售人員,我們將盡快為您解決。
MS1細(xì)胞|慧穎科研用|小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞株細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)問(wèn)題分析
細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
5、何謂FBS, FCS, CS, HS ?
FBS (fetal bovine serum) 和FCS (fetal calf serum) 是相同的意思, 兩者都是指胎牛血清, FCS 乃錯(cuò)誤的使用字眼, 請(qǐng)不要再使用。CS (calf serum) 則是指小牛血清。HS (horseserum) 則是指馬血清。
6、培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)應(yīng)使用5 % 或10% CO2?或根本沒(méi)有影響?
一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作為pH 的緩沖系統(tǒng), 而培養(yǎng)基中NaHCO3 的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用的CO2 濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3 含量為每公升3.7 g 時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)應(yīng)使用10 % CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3 為每公升1.5 g 時(shí), 則應(yīng)使用5 % CO2 培養(yǎng)細(xì)胞。
7、何時(shí)須更換培養(yǎng)基?
視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定, 或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。
8、培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?
除于特殊篩選系統(tǒng)中外, 一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下, 培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
9、附著性細(xì)胞繼代時(shí)所使用之trypsin-EDTA 濃度?應(yīng)如何處理?
一般使用之trypsin-EDTA 濃度為0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4 Na。*次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中, 保存于–20 ℃,避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin 之活性降低, 并可減少污染之機(jī)會(huì)。
10、懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?
一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中, 稀釋細(xì)胞濃度即可, 若培養(yǎng)液太多時(shí), 可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高, 直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶, 加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度, 重復(fù)前述步驟即可。
11、欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?
欲回收動(dòng)物細(xì)胞, 其離心速率一般為300xg (約1,000rpm),5 - 10 分鐘, 過(guò)高之轉(zhuǎn)速, 將造成細(xì)胞死亡。
12、細(xì)胞之接種密度為何?
依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤(pán)之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)之一重要原因。
13、細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?
動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)zui常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5 - 10 %DMSO (dimethyl sulfoxide) 和90 - 95 % 原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO 稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能, 故不可將DMSO 直接加入細(xì)胞液中, 必須使用前先行配制完成。
14、DMSO 之等級(jí)和無(wú)菌過(guò)濾之方式為何?
冷凍保存使用之DMSO 等級(jí), 必須為T(mén)issue culture grade之DMSO (如Sigma D2650), 其本身即為無(wú)菌狀況, *次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中, 保存于4°C, 避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO 之裂解而釋出有害物質(zhì), 并可減少污
客戶問(wèn)題1:
剛剛收到細(xì)胞,貼壁少,密度低,狀態(tài)不好
回答1:
因?yàn)檫\(yùn)輸過(guò)程的影響,細(xì)胞出現(xiàn)貼壁松動(dòng)、脫落,是正常的。處理建議:把細(xì)胞放回培養(yǎng)箱培養(yǎng),更換15%血清,脫落下來(lái)的細(xì)胞離心后種在新的培養(yǎng)瓶里面,也是用15%血清,一般養(yǎng)3-4天左右,傳1-2代后,細(xì)胞即可逐漸恢復(fù)。
客戶問(wèn)題2:
消化傳代后,細(xì)胞死亡多,不貼壁
回答2:
這種情況,基本上是客戶在消化的時(shí)候,胰酶消化過(guò)度,造成細(xì)胞較嚴(yán)重的損傷。處理建議:根據(jù)胰酶實(shí)際使用效果,摸索一個(gè)*消化時(shí)間,嚴(yán)控消化過(guò)度;如果已經(jīng)操作造成消化過(guò)度,把血清調(diào)高到15%,讓存留的貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)起來(lái),期間不要頻繁換液,維持在3-4天更換一次培養(yǎng)基即可,等細(xì)胞密度超過(guò)50%以后,再隔天換液
客戶問(wèn)題3:
細(xì)胞培養(yǎng)中有黑點(diǎn)或者亮圓點(diǎn)
回答3:
要客戶首先排除是否污染,如果這些黑點(diǎn)或者亮點(diǎn)是污染物,那么培養(yǎng)基會(huì)在1-2天內(nèi)變渾濁,同時(shí)鏡下可觀察到這些黑點(diǎn)或者亮點(diǎn)呈爆發(fā)式生長(zhǎng)。如果培養(yǎng)基不會(huì)渾濁排除污染,這些黑點(diǎn)就是細(xì)胞死亡后的碎片殘?jiān)?,用PBS可以把大部分清洗掉。如果PBS清洗后還是有較多附著在瓶底的碎
收到細(xì)胞株應(yīng)及時(shí)查看外包裝有無(wú)破損,鏡下觀察有異常及時(shí)拍照發(fā)給相關(guān)負(fù)責(zé)人以便及時(shí)的幫您處理。
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