HaCaT細胞，人永生化表皮細胞形態(tài)

產品名稱：HaCaT細胞

中文名稱：人永生化表皮細胞

來源：人皮膚

類別：類屬于正常細胞

細胞形態(tài)：上皮樣

生長狀態(tài)：貼壁生長

培養(yǎng)基：DMEM 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件：37℃，5% CO2

消化條件：0.25% (w/v) Trypsin-0.03%(w/v) EDTA 溶液，消化 5-10min

主營細胞：DC2.4細胞，HOS細胞，3D4/21細胞，HCAEC細胞，Tca-8113細胞，NCI-H460細胞，MCF-7細胞，U251細胞

消化比例：1：4-1：10

換液時間：2-3 天換液一次

凍存液比例：85%培養(yǎng)基，10%FBS，5% (v/v) DMSO

凍存密度：1-3 ×10^6/管，液氮保存

主營細胞：CNE細胞，MADB-106細胞，Sf9細胞，HOC細胞，3T3-L1細胞，THP-1細胞。

若客戶收到2ml小管HaCaT細胞，人永生化表皮細胞形態(tài)

收到細胞以后，用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作；然后將小管細胞轉移至T25培養(yǎng)瓶，加入5ml左右含FBS的培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱隔夜培養(yǎng)后查看細胞匯合度：若未超過80%匯合度，換液繼續(xù)培養(yǎng)，根據情況傳代或者凍存。若超過80%匯合度，可直接進行傳代（細胞貼壁處理方法）。

1、細胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細胞運輸的辦法。從細胞資源中心獲得細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作。

2、鏡下觀察：將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，按要求比例消化傳代。（收到細胞，建議棄去原基培養(yǎng)，使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng)）

3、消化方法：

1、將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。（收到細胞，建議棄去原基培養(yǎng)，使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng)）

2、T25瓶加3ml PBS，洗一次，棄上清，再加1ml消化液消化，顯微鏡下觀察，等細胞*脫離瓶壁分離成單個后，加培養(yǎng)基混勻，離心收集，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶加培養(yǎng)基至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。

慧穎生物購買HaCaT細胞，人永生化表皮細胞形態(tài)注意事項：

1、客戶在收到細胞時，請首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否外滲，培養(yǎng)液是否混濁。如發(fā)現有瓶破、滲漏、培養(yǎng)液混濁等問題，請在收到細胞后立即與我們 王。

2、由于運輸過程中的問題，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現細胞懸浮的情況，出現此狀態(tài)時，請離心收集，重懸細胞，置培養(yǎng)箱培養(yǎng)，細胞會重新貼附于瓶壁。如果細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力。

3、收到細胞時如無異常情況，請按照細胞處理方法處理細胞。