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人骨肉瘤細(xì)胞,U-2OS 簡介:
細(xì)胞名稱:U-2 OS人骨肉瘤細(xì)胞
性別:女
組織來源:骨;骨肉瘤
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞
細(xì)胞背景:J. Ponten and E. 這株細(xì)胞(原名2T)源自15歲女孩的脛骨中等分化的肉瘤。 與WI-38共培養(yǎng)或CF檢測SV40,RSV或腺病毒時未檢測到病毒。 1972年發(fā)現(xiàn)支原體污染并去除。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。
培養(yǎng)條件:RPMI-1640(GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L),85%;熱滅活馬血清,10%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,5%。 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度。
人骨肉瘤細(xì)胞,U-2OS 細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)隔夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)隔夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項:
1)收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
2) 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
相關(guān)主要細(xì)胞株細(xì)胞系:
產(chǎn)品名稱 簡稱 分類
人骨肉瘤細(xì)胞 HOS 骨,軟骨,肌肉
人骨肉瘤細(xì)胞 U-2OS 骨,軟骨,肌肉
人成骨肉瘤細(xì)胞 MG-63 骨,軟骨,肌肉
人骨肉瘤細(xì)胞 SW1353 骨,軟骨,肌肉
熒光素酶轉(zhuǎn)染人成骨肉瘤細(xì)胞 U2OS-LucteT-on 骨,軟骨,肌肉
人骨肉瘤細(xì)胞 U2OSE6Tet6 骨,軟骨,肌肉
人骨肉瘤細(xì)胞 SF-86 骨,軟骨,肌肉
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