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產品名稱：BEL-7402細胞

中文名稱：人肝癌細胞

培養(yǎng)基：RPMI-1640 90%, Fetal Bovine Serum 10%

培養(yǎng)條件：37℃ 5% CO2

消化條件：0.25% (w/v) Trypsin-0.53mM EDTA 溶液，消化 5-10min

傳化比例：1：3 -1：5

換液時間：2-3 天換液一次

凍存液比例：85%培養(yǎng)基，10%FBS, 5% (v/v) DMSO

凍存密度：1-3 ×10^6/管，液氮保存

細胞介紹：BEL-7402 細胞為人肝癌細胞，來源于人肝癌，中文名為人肝癌細胞， 正常的細胞形態(tài)為上皮樣，貼壁生長。BEL-7402細胞株是1974年從臨床肝癌手術標本中建立的。 細胞群體倍增時間為20小時。 移植到處理過的wistar大鼠中的能形成腫瘤結節(jié)。 細胞形態(tài)呈上皮樣細胞。 在電子顯微鏡下亦顯示上皮細胞所具有的橋粒和張力原纖維，與臨床肝癌細胞相似。 分瓶培養(yǎng)第四天時，其有絲分裂指數約為7%。 BEL-7402細胞的染色體數為不足三倍體，有一個異常的近端著絲點染色體。 間接免疫熒光法測BEL-7402細胞內的AFP為陽性反應。 LDH同工酶譜顯示與成年人肝細胞不同，而與人胚肝及臨床肝癌相近。

BEL-7402細胞|慧穎科研用|人肝癌細胞 操作說明：

懸浮生長細胞的傳代：直接直接吸去或離心后吸去培養(yǎng)上清液，用新鮮培養(yǎng)液懸浮細胞，1：3或1：5稀釋細胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

貼壁生長細胞的傳代：吸去培養(yǎng)液，用PBS洗滌細胞一次，加入消化液，在37℃中消化約3～10分鐘，待細胞開始脫落時，倒去消化液，加入新鮮培養(yǎng)液，懸浮和吹打分散細胞。也可以待細胞*消化脫落，500×g離心5分鐘，去除消化液，用新鮮培養(yǎng)液懸浮細胞。1：3或1：5稀釋細胞后，分瓶繼續(xù)培養(yǎng)。

2）細胞株的凍存：

1． 取培養(yǎng)2～3天生長旺盛的細胞，用細胞培養(yǎng)液將細胞配成2×106～2×107/ml。

2． 在1ml細胞凍存管中加入0.5ml細胞懸液，0.4ml小牛血清和0.1ml二甲基亞砜（或甘油），混勻后密封。置4℃ 1小時，－20℃ 2小時，然后直接放入液氮中或置液氮蒸汽上隔夜后浸入液氮中。

3）細胞株的復蘇：復蘇時，從液氮中取出凍存管，立即置37℃水浴中融化細胞。將細胞直接加入10ml含15％小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液中，置37℃ 5％CO2飽和水汽二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。懸浮細胞待細胞全部沉降后小心吸去上清液，更換新鮮的上述培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)；帖壁細胞則培養(yǎng)2～3小時，待細胞帖壁后，倒去培養(yǎng)液，更換新鮮的上述培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。也可以在加入新鮮培養(yǎng)液以后，500×g離心5分鐘，去上清液，加入新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。

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