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上?;鄯f生物提供人源細(xì)胞STR鑒定服務(wù),價格很便宜,800元/株,量大更優(yōu),提供具體的實(shí)驗(yàn)報告。除人源細(xì)胞(ATCC推薦的11個位點(diǎn)+9個多態(tài)位點(diǎn))鑒定外,還提供小鼠品系鑒定(SNP方法)以及小鼠細(xì)胞STR分型鑒定(9個STR位點(diǎn)+兩個人源污染位點(diǎn))。
慧穎生物有10年SNP分型經(jīng)驗(yàn),已經(jīng)完成的SNP分型數(shù)據(jù)近千萬,采用LDR技術(shù)發(fā)表的SCI論文數(shù)百篇,并且有3篇發(fā)表于*期刊Nature Genetics上。具有市場競爭力的價格!我們公司還有SNP分型服務(wù);STR分型;分子遺傳學(xué)、分子生物學(xué)服務(wù)(SNP/STR分型、CNV檢測、測序、Real time qPCR、microRNA檢測、MCF基因表達(dá)分析系統(tǒng)、定制PCR array)
在正常細(xì)胞中,磷脂酰絲氨酸只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè),細(xì)胞發(fā)生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V是一種磷脂結(jié)合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V被作為檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。在細(xì)胞發(fā)生凋亡時,膜磷脂酰絲氨酸外翻的發(fā)生早于細(xì)胞核的變化,而此時Propidium Iodide(PI)不能通過細(xì)胞膜。
細(xì)胞壞死時,雖然也會發(fā)生磷脂酰絲氨酸外翻,但此時細(xì)胞膜的通透性明顯增加,PI等核酸染料進(jìn)入細(xì)胞與細(xì)胞核中的核酸結(jié)合,發(fā)出紅色熒光。所以Annexin V-FITC(綠色熒光)常與鑒定細(xì)胞死活的核酸染料(如PI)合并使用,來區(qū)分凋亡細(xì)胞與死亡細(xì)胞。
技術(shù)原理及步驟
1. 離心收集細(xì)胞,微量離心機(jī)轉(zhuǎn)速1000 rpm,離心時間5 min,棄培養(yǎng)基。
2. 用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次。
3. 用400 μL1× Binding Buffer懸浮細(xì)胞,濃度大約為1×106 cells/mL。
4. 在細(xì)胞懸浮液中加入5 μlLAnnexin V-FITC,輕輕混勻后于2~8°C避光條件下孵育15min。
5. 加入10 μL PI后輕輕混勻于2~8°C避光條件下孵育5 min。
6. 在1小時內(nèi)用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡檢測。
應(yīng)用實(shí)例
應(yīng)用領(lǐng)域
細(xì)胞的早期凋亡及區(qū)分凋亡與壞死細(xì)胞
服務(wù)周期
我公司在正式接受實(shí)驗(yàn)委托2個星期左右完成實(shí)驗(yàn)并提供實(shí)驗(yàn)報告。
客戶須知(對材料的要求、注意事項(xiàng))
需提供細(xì)胞類型,處理?xiàng)l件。
慧穎生物專業(yè)血清10年,我們不生產(chǎn)血清,我們只是高品質(zhì)動物血清的搬運(yùn)工
血清是一種成分復(fù)雜的混合物,不同批次血清對細(xì)胞生長的促進(jìn)作用不同。大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中由血清引起的細(xì)胞生長狀態(tài)不佳及病毒滴度的影響表現(xiàn)在以下幾個方面:
1、細(xì)胞生長速度緩慢,長滿單層時間長;從同一細(xì)胞瓶中分出兩瓶細(xì)胞,用同一種培養(yǎng)液,分別加入10%的對照血清和待檢血清,在相同條件下培養(yǎng)72小時,會出現(xiàn)對照血清長滿單層,而待檢血清大約只有60~70%,這種血清就不適合用來大規(guī)模培養(yǎng)細(xì)胞。
2、細(xì)胞傳代后形態(tài)不正常,細(xì)胞狀態(tài)發(fā)生變化 ;由于血清的質(zhì)量問題,使原本狀態(tài)正常的細(xì)胞經(jīng)傳代后形態(tài)會變差;比如:細(xì)胞瓶里會出現(xiàn)一些蠕動的小黑點(diǎn)(并非污染),或者細(xì)胞表面形成一層油狀覆蓋物;細(xì)胞的輪廓變得模糊,細(xì)胞之間的間隙被血清中的蛋白顆粒填充,從而影響細(xì)胞向四周擴(kuò)展生長。
3、細(xì)胞傳幾代后就出現(xiàn)脫壁現(xiàn)象,不能連續(xù)傳代 ;質(zhì)量較差的血清缺乏某種細(xì)胞的貼壁因子,會使細(xì)胞在傳代過程中逐漸喪失貼壁的能力。細(xì)胞會從正常的貼壁狀態(tài),邊緣開始萎縮,上翹。觀察到的現(xiàn)象就是細(xì)胞表面不光滑,晃動細(xì)胞瓶會看到細(xì)胞表面有絮狀物隨培養(yǎng)液波動。隨著傳代次數(shù)增加,細(xì)胞萎縮的情況越來越嚴(yán)重,直到zui終*脫壁而死亡。
4、細(xì)胞長的很好,致密的單層,狀態(tài)也很正常,但是接毒后細(xì)胞基本不發(fā)生病變,做滴度檢測幾乎測不出抗原滴度。這種情況也許是因?yàn)檠逯泻信c接種的病毒有同源的特異性抗體。比如血清中經(jīng)常會存在乙腦抗體,牛腹瀉病毒抗體等,如果存在這些抗體,就會把接進(jìn)去的病毒給中和掉。如果抗體滴度很高,病毒會被抗體*中和,就沒有病毒顆粒在細(xì)胞中增殖,所以會檢測不到病毒滴度。這種情況給疫苗企業(yè)造成的損失是相當(dāng)大的,不產(chǎn)毒等于前面所做的那么多工作全部白費(fèi),浪費(fèi)人力、物力,尤其是時間上的浪費(fèi),從培養(yǎng)細(xì)胞開始到接病毒,到收液至少需要一兩個月,一旦出現(xiàn)不產(chǎn)毒的情況,那么這一兩月時間就白白浪費(fèi)掉了,這也是牛血清給疫苗企業(yè)造成的風(fēng)險之一。
5、細(xì)胞生長的狀態(tài)一般,產(chǎn)毒少,毒價低。這種情況比較常見,細(xì)胞是病毒的載體,由于血清質(zhì)量不好,導(dǎo)致細(xì)胞生長狀態(tài)不好,病毒就無法進(jìn)行正常的復(fù)制。并非所有病毒都不能復(fù)制,所以就造成疫苗的效價不夠,可能造成不合格產(chǎn)品。
看來一款血清直接關(guān)系細(xì)胞的生死存亡,不用擔(dān)心,慧穎提供無支原體,低內(nèi)毒素和低血紅素的,無反復(fù)凍融的高品質(zhì)12676-029血清
產(chǎn)品名稱 貨號 來源 規(guī)格 市場價格
胎牛血清FBS 10270-106 SOUTH AMERICA 500ML 3200
胎牛血清FBS 10270-106 SOUTH AMERICA 500ML 3200
胎牛血清FBS c2027050 SOUTH AMERICA 500ML 2600
優(yōu)等胎牛血清FBS 10437-028 Mexico 500ML 3200
優(yōu)等胎牛血清FBS 10437-028 Mexico 500ML 3200
優(yōu)等胎牛血清FBS 10437-028 Mexico 500ML 3200
優(yōu)等胎牛血清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000
優(yōu)等胎牛血清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000
優(yōu)等胎牛血清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000
特級胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800
特級胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800
特級胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800
優(yōu)等胎牛血清FBS 26140-079 USA 500ML 3600
優(yōu)等胎牛血清FBS 26140-079 USA 500ML 3600
熱滅活胎牛血清FBS heat inactivated 10082-147 USA 500ML 5600
熱滅活胎牛血清FBS heat inactivated 10100-147 AUSTRALIA 500ML 14239
熱滅活胎牛血清FBS heat inactivated 10100-147 AUSTRALIA 500ML 14239
超低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS 16250-078 USA 500ML 6000
透析胎牛血清Dialyzed FBS 264000-044 USA 500ML 6800
活性炭/葡聚糖處理胎牛血清Charcoal Stripped FBS 12676-029 USA 500Ml 6800
新生牛血清New born calf serum 16010159 New Zealand 500ML 1035
馬血清Horse Serum 16050-122 New Zealand 500ML 909
熱滅活馬血清Heat-Inactivated Horse Serum 26050-088 New Zealand 500Ml 1069
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