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細(xì)胞計(jì)數(shù)
原理:當(dāng)待測(cè)細(xì)胞懸液中細(xì)胞均勻分布時(shí),通過(guò)測(cè)定一定體積懸液中的細(xì)胞的數(shù)目即可換算出每mL細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量。
操作步驟:
1. 將計(jì)數(shù)板及蓋玻片擦拭干凈,并將蓋玻片蓋在計(jì)數(shù)板上。
2. 輕輕吹打細(xì)胞懸液,使細(xì)胞均勻分布。吸出少許細(xì)胞懸液滴在細(xì)胞入口,使細(xì)胞懸液充滿蓋玻片和計(jì)數(shù)板之間,靜置1~2min,使細(xì)胞沉降。注意蓋玻片下不要有氣泡,也避免細(xì)胞懸液進(jìn)入旁邊的槽中。
3. 在顯微鏡下對(duì)A/B/C/D四個(gè)大格內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),壓在大格四周邊線上的細(xì)胞只計(jì)數(shù)壓在2條邊線上的細(xì)胞(如右側(cè)和下方)。若鏡下有2個(gè)細(xì)胞組成的細(xì)胞團(tuán),則應(yīng)按單個(gè)細(xì)胞計(jì)算;若細(xì)胞團(tuán)數(shù)量較多,占細(xì)胞總量的10%左右,則說(shuō)明細(xì)胞分散不好會(huì)導(dǎo)致計(jì)算不準(zhǔn)確,需要重新制備細(xì)胞懸液。
4. 按公式計(jì)數(shù)細(xì)胞數(shù)量 細(xì)胞數(shù)/mL=四個(gè)大格內(nèi)細(xì)胞總數(shù)×104/4
(每一個(gè)大格的體積為長(zhǎng)1mm×寬1mm×高0.1mm=0.1mm3,1mL=1000 mm3,因此計(jì)算時(shí)需×104)
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