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小鼠ELISA試劑盒是基于標(biāo)準(zhǔn)的雙抗夾心酶聯(lián)免疫分析技術(shù)。將小鼠E選擇素特體包被96孔小鼠E選擇素檢測抗體為生物素標(biāo)記抗體試驗樣品和生物標(biāo)記的檢測抗相繼加入到96孔中,然后洗滌平板。生物素-HRP加入96孔中,未與生物素標(biāo)檢測抗體結(jié)合的,被洗滌緩沖液洗掉HRP的底物TMB可與HRP(辣根過氧化物酶)發(fā)生酶促反應(yīng)。TMB被HRP催化后變成藍色物質(zhì),在加入酸性終止液后變?yōu)辄S色。黃顏色的深淺與小鼠E選擇素樣品被捕獲的量成正比。
酶聯(lián)免疫測定方法是以抗原抗體間的特異反應(yīng)為基礎(chǔ)的,其與生化的化學(xué)反應(yīng)有著本質(zhì)的區(qū)別,并且因為標(biāo)記物猶如位素、酶、熒光素、微量元素、發(fā)光物質(zhì)等的摻人,酶聯(lián)免疫測定技術(shù)從低敏捷的免疫沉淀和免疫凝集反應(yīng)進入到了高敏捷的放射免疫、酶免疫、熒光免疫和發(fā)光免疫測定時代,可見酶聯(lián)免疫測定更多的是用于生物活性物質(zhì)的微量測定。
從理論上說,一種生物或生理活性物質(zhì),只要有辦法得到其特異的抗體,就可以建立這種物質(zhì)的酶聯(lián)免疫測定方法。而在血站,HBsAg,抗HCV,抗HIV和梅毒抗體等標(biāo)志物的檢測,哪怕是1%的錯誤,對將要接受輸血的特定患者來說,就是100%的災(zāi)害。可見,酶聯(lián)免疫測定的質(zhì)量控制有多么重要。近期,在電視、報紙等新聞媒體中,??梢姷揭恍┯嘘P(guān)醫(yī)患糾紛的報道,其中一些就與酶聯(lián)免疫測定有關(guān),如輸血后丙肝病毒、艾滋病毒感染的發(fā)生,性病檢測的假陽性等。在以前看來一些難以進行質(zhì)量測定的微量生物活性物質(zhì),如受體、細(xì)胞因子以及酶等均可使用酶聯(lián)免疫測定技術(shù)來測定。
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