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檢測(cè)原理上海ELISA試劑盒
試劑盒采用雙抗體白介素ELISA試劑盒一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人白介素17(IL-17)捕獲抗體的包被微孔中,禽ELISA試劑盒依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。ELISA試劑盒價(jià)格用底物TMB顯色,豬ELISA試劑盒TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。ELISA試劑盒顏色的深淺和樣品中的人白介素17(IL-17)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
操作注意事項(xiàng)
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條豬ELISA試劑盒應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液即可視為陰性對(duì)照或者空白;ELISA試劑盒預(yù)處理后的樣本無(wú)需上海ELISA試劑盒稀釋,直接取10μL加樣即可。
4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)禽ELISA試劑盒中標(biāo)明的時(shí)間、ELISA試劑盒價(jià)格加液量及順序進(jìn)行溫育操作。
5. 所有液體組白介素ELISA試劑盒分使用前充分搖勻。
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