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慧穎生物ELISA試劑盒廠家,提供人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)ELISA試劑盒以及說明書,操作步驟和原理。
產(chǎn)品名稱:人水痘帶狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)ELISA試劑盒
英文名稱:Human Varicella zoster virus IgG,VZV-IgG ELISA Kit
品牌:DECO
規(guī)格:48T/96T
貨號:DECO0001
儲存溫度:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)
有效期:6個月
產(chǎn)品特點:檢測范圍廣,靈敏度高,特異性強,精密度高,比較有針對性
品牌優(yōu)勢:提供免費代測,專業(yè)技術(shù)工程師幫老師做均值分析,變異系數(shù)分析等
ELISA各種樣本收集、處理、保存方法
1. 血清標本收集、處理、保存方法:
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標本,全血標本室溫放置1-2 h或4℃guo夜,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
2. 血漿標本收集、處理、保存方法:
根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標本,室溫混合20 min左右,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
3. 尿液標本收集、處理、保存方法:
用干凈容器收集尿液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
4. 唾液標本收集、處理、保存方法:
用干凈離心管收集唾液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
5. 細胞標本收集、處理、保存方法:
(1)細胞培養(yǎng)上清
取細胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
(2)細胞裂解液
收集細胞培養(yǎng)液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,棄去上清,用預(yù)冷的PBS(0.01M,PH 7.4)洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通過反復凍融,使細胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min,除去細胞碎片,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
6. 植物標本收集、處理、保存方法:
取適量大小組織塊(一般0.2-0.5 g),用預(yù)冷的PBS緩沖液(0.01M,PH 7.4)漂洗三次,濾紙拭干水分。準確稱重,放入勻漿管中,加入4倍體積的勻漿介質(zhì)(0.05 mol/L Tris-HCl,pH 7.4 PBS緩沖液)于勻漿管中,冰水浴條件下,剪碎組織塊,手工勻漿或機器勻漿,制成勻漿液。4℃、10000 rpm/min離心20 min,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
7. 糞便標本收集、處理、保存方法:
采集時用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中,向離心管中加入適量PBS緩沖液(0.01M,PH 7.4),攪拌均勻。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
8. 組織標本收集、處理、保存方法:
將組織樣本用PBS緩沖液(0.01M,PH 7.4)沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質(zhì)。將組織塊稱重,記錄后剪碎(碎塊盡量小)。將組織按一定的比例(通常組織重量:PBS體積=1:9)加入預(yù)冷的PBS緩沖液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)中勻漿,勻漿時置于冰上。吸取勻漿液到離心管中,4℃、10000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
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ELISA試劑盒標本及收集、貯運要素
① 嚴峻溶血:以HRP為符號的ELISA測定中,殘留在孔內(nèi)的血紅蛋白具有過氧化物酶樣活性,催化底物顯色構(gòu)成假陽性;
② 混有紅細胞的血清易沉積或附著在聚乙烯孔內(nèi)不易洗凈
③ 如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會發(fā)生假陽性反響;
④ 標本凝結(jié)不全,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開端凝結(jié)時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以構(gòu)成肉眼可見的纖維蛋白塊,易構(gòu)成假陽性成果;
⑤ 采血試管洗滌不*、重復運用易穿插污染
⑥ 塑料試管能吸附抗原物質(zhì) ,樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降構(gòu)成假陰性。
血清標本宜在新鮮時檢測,嚴峻溶血標本禁用。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃,標本在冰箱中保存時間過長導致血清IgG 聚合,使間接法的 試劑 本底加深。超過一周測定的需-20℃保存。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)部分濃縮,散布不均,應(yīng)充沛混勻并避免發(fā)生氣泡?;鞚峄蛴谐练e的血清標本應(yīng)先離心或過濾,弄清后再檢測。重復凍融會使 抗體 效價跌落,所以測 抗體 的血清標本如需保存作屢次檢測,宜少量分裝冰存。
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ELISA試劑盒使用問題及解決方法:
【1】:加樣量不一致?
解決方法:樣品稀釋前應(yīng)充分混勻,盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。
【2】:樣品數(shù)量多少不一,加樣時間有長有短?
解決方法:重復某一樣品時,加樣時間盡可能與di yi次接近。
【3】:保溫時間不一致,洗滌條件不一致,操作人員不一致?
解決方法:重復測定標本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性。
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