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15821734033
細(xì)胞名稱:B16小鼠黑色素瘤細(xì)胞
貨號(hào):M005
種屬:小鼠
細(xì)胞來源:從ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進(jìn)
生長(zhǎng)特性:貼壁 上皮樣和紡錘形混合
培養(yǎng)條件:培養(yǎng)基:DMEM(H)+10%FBS(推薦使用HAKATA優(yōu)等胎牛血清HN-FBS-50)
溫度:37℃
氣相:95%空氣,5%二氧化碳
傳代說明:
1.用75%酒精噴灑整個(gè)培養(yǎng)瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行1-3小時(shí)的緩沖,.然后置于無菌操作臺(tái),打開瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基(以T25培養(yǎng)瓶為例)并置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀況及培養(yǎng)基顏色變化對(duì)其進(jìn)行換液以及傳代,一般2到3天換一次液;
2.待細(xì)胞長(zhǎng)滿瓶底面積80%-90%,需要對(duì)其進(jìn)行傳代,傳代比例為1:3到1:8;
3傳代步驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37°預(yù)熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入3-5 ml PBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預(yù)熱好的胰酶,置于37°孵育消化(次消化需時(shí)常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細(xì)胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細(xì)胞脫落為*消化時(shí)間,記錄*消化時(shí)間,以便于下次消化),消化好后加入3ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后收集細(xì)胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,進(jìn)行傳代。
保存說明:
凍存條件:80%*培養(yǎng)基+10%FBS+10%DMSO
(備注:建議使用本公司的冷凍液(H-W-100),用4度保存的冷凍液直接重懸細(xì)胞,不能預(yù)熱后使用。)
保存條件:液氮存儲(chǔ)
常見問題說明:
1.培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞極大可能會(huì)污染,所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。
2.收到細(xì)胞后盡快更換為含 10%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加 10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間zui長(zhǎng)不宜超過 72 小時(shí))
3.細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。1-2小時(shí)后觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留8-10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
供應(yīng)商:慧穎細(xì)胞庫 人源均來自于第三方str鑒定,請(qǐng)放心購買
供應(yīng)限制:僅供科研使用
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SUER1258(XR) HuH28細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1259(XR) HuH-6細(xì)胞,肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1260(XR) HuH-7細(xì)胞,肝癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1261(XR) HuNS1細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1262(XR) HUP-T3細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1263(XR) HUP-T4細(xì)胞, 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1264(XR) HuT 102細(xì)胞,霉菌病fungoides-Sezary綜合癥細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1939(XR) NCM460細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1940(XR) NHEK細(xì)胞,正常人皮膚角質(zhì)細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1941(XR) SH-EP1細(xì)胞,神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1942(XR) SGC7901/ADR細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1943(XR) TA-K細(xì)胞,人甲狀腺未分化癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1944(XR) TAM-1細(xì)胞,人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
SUER1945(XR) NHBE細(xì)胞,人正常支氣管上皮細(xì)胞 1×106 1ml/T25 詢價(jià)/元
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