血清10099-141 2017年這個(gè)夏天如何選擇高品質(zhì)，放心使用的血清？慧穎生物與您相伴，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中助您一臂之力。

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胎牛血清FBS （fetal bovine serum）：心臟穿刺的方法采血。剖腹產(chǎn)胎牛，未接觸外界，血清中的抗體補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的有害成分zui少。

新生牛血清：出生24小時(shí)內(nèi)

小牛血清CS(calf serum)：出生10-14天

馬血清HS(horse serum)

常用的血清廠家：GIBCO|SERANA|Bovogen|Gemini|Sigma|PAA|GE Hyclone

常用貨號(hào):10099-141|16000-044|26140-079|10099-133|10010-147|10082-147|S-FBS-SA-015|S-FBS-AU-015|900-108|100-500|F2442|SH30084.03|SH30396.03|SH30070.03|SH30068.03等

血清的溶解與保存

1、如果不用，先放置-80 ℃保存。

2、如果要用，可于4 ℃冰箱放置過(guò)夜，再在室溫溶解。

3、溶解好的血清應(yīng)立即分裝，-80 ℃保存。

4、保存于-80 ℃的血清解凍時(shí)應(yīng)先與4 ℃冰箱放置過(guò)夜再在室溫溶解。切勿直接放在室溫溶解。

細(xì)胞傳代方法

根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的恃點(diǎn)，傳代方法有3種：

1．懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代

   離心法傳代：離心（1000轉(zhuǎn)/分）去上清，沉淀物加新培養(yǎng)液后再混勻傳代。

   直接傳代法：懸浮細(xì)胞沉淀在瓶壁時(shí)，將上清培養(yǎng)液去除l／2一2／3，然后用吸管直接吹打形成細(xì)胞懸液再傳代。

2．半懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞傳代（雜交瘤）

   此類(lèi)細(xì)胞部分呈現(xiàn)貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象，但貼壁不牢，可用直接吹

打法使細(xì)胞從瓶壁脫落下來(lái)，進(jìn)行傳代。

3．貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞傳代

   采用酶消化法傳代。常用的消化液有0.25％的胰蛋白酶液。

細(xì)胞冷凍保存

1. 細(xì)胞應(yīng)生長(zhǎng)良好，處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，密度為80%左右。
   2.注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。 DMSO質(zhì)量要好，應(yīng)無(wú)菌且無(wú)色。
   3.  冷凍保存之細(xì)胞濃度：一般成纖維細(xì)胞1~3 x 106 cells/ml，懸浮細(xì)胞 5~10 x 106cells/ml，上皮細(xì)胞 2~5 x 106 。

4.凍存液的配方是： 60%無(wú)血清培養(yǎng)液 30%血清 10% DMSO

1. 冷凍方法:  4℃ 30-60 分鐘---> -80℃ 6H - 隔夜 ---> 液氮長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

之細(xì)胞生長(zhǎng)減慢

提高血清濃度為15-20%；

提高接種密度；

細(xì)胞的離散度；

添加細(xì)胞生長(zhǎng)因子；

之細(xì)胞不貼壁

胰蛋白酶消化過(guò)度；

支原體污染；

培養(yǎng)液中無(wú)貼壁因子

之細(xì)胞傳代過(guò)程中出現(xiàn)碎片、顆粒、小黑點(diǎn)的原因

排除細(xì)胞污染后主要有以下幾種可能：

細(xì)胞長(zhǎng)老了,傳代時(shí)細(xì)胞已100%滿(mǎn)度，細(xì)胞衰老；

消化時(shí)不*，吹打過(guò)度；

血清溶解時(shí)直接從-80℃放到37 ℃或室溫；

以上資料有上?；鄯f生物市場(chǎng)部 王麗 編輯整理